BMP-4 小鼠骨成型蛋白4ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
BMP-4 小鼠骨成型蛋白4ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
AP2 alpha英文名稱：轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體
ANP英文名稱：心鈉素抗體
AARS2英文名稱：丙氨酰tRNA合成酶2抗體
Alpha-Synuclein英文名稱：核突觸蛋白α抗體
APG4B英文名稱：自噬相關(guān)蛋白4B抗體
alpha Actinin 4-Loading Control英文名稱：α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體
Alkaline Phosphatase英文名稱：堿性磷酸酶抗體
AU1 tag英文名稱：AU1 tag標(biāo)簽抗體
AEBP1英文名稱：脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
AKT1英文名稱：蛋白激酶B
AKT1英文名稱：蛋白激酶B
ANGL2英文名稱：血管生成素樣蛋白2抗體
Angiopoietin 4英文名稱：血管生成素3/血管生成素4抗體
Annexin I英文名稱：膜粘連蛋白 I抗體
Annexin A2英文名稱：膜粘連蛋白 Ⅱ抗體
ATF1英文名稱：活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
Aquaporin 4 英文名稱：水通道蛋白4抗體
ATF2英文名稱：活化復(fù)制因子2抗體
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